மூலக்கூறு உயிரியல் மற்றும் முறைகளின் இதழ்

qRT-PCR வழியாக நஞ்சுக்கொடி gDNA மற்றும் mRNA ஐப் பயன்படுத்தி எலி கரு பாலின நிர்ணயம்

அந்தோனி எல் சு மற்றும் ரீட்டா லோச்-கருசோ

கருவின் பாலினத்தை ஒரு உயிரியல் மாறியாகக் கருதுவதற்கும் பாலின-குறிப்பிட்ட விளைவுகளைத் துல்லியமாக மதிப்பிடுவதற்கும் வளர்ந்து வரும் தேவை உள்ளது. கருவின் பாலினத்தை தீர்மானிக்கப் பயன்படுத்தப்படும் பல முறைகளில், டிரான்ஸ்கிரிப்டோமிக்ஸ் மற்றும் பார் உடலைக் கண்டறிதல் போன்ற வழிமுறைகளைப் பயன்படுத்துவதோடு, மரபணு DNA (gDNA) உடன் Sry (பாலினத்தை நிர்ணயிக்கும் பகுதி Y) இன் அளவு நிகழ்நேர பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (qRT-PCR) பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. . இருப்பினும், SrygDNA இன் தயாரிப்பான Sry messenger RNA (mRNA), பாலின நிர்ணயத்திற்காக முன்னர் மதிப்பிடப்படவில்லை. கர்ப்பகால நாள் (ஜிடி) 16 இல், கர்ப்ப காலத்தில் கர்ப்பமாக இருக்கும் விஸ்டார் எலிகளின் நஞ்சுக்கொடி மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி, இந்த ஆய்வு, கருவின் பாலினத்தை தீர்மானிக்க ஜிடிஎன்ஏ மற்றும் எம்ஆர்என்ஏவைப் பயன்படுத்தி ஸ்ரீ கண்டறிதலின் பொருந்தக்கூடிய தன்மையை மதிப்பீடு செய்தது. இந்த தற்போதைய ஆய்வில் பயன்படுத்தப்படும் மாதிரிகள் டிரிக்ளோரெத்திலீன் (டிசிஇ) இனப்பெருக்க நச்சுத்தன்மை மற்றும் என்-அசிடைல்-எல்-சிஸ்டைன் (என்ஏசி) மற்றும் அமினோக்சியாசெட்டிக் அமிலம் (ஏஓஏஏ) ஆகியவற்றின் சாத்தியமான பண்பேற்றத்தை ஆய்வு செய்த ஒரு பெரிய ஆய்வில் இருந்து வந்தவை. 91 மாதிரிகளில் 90 இல், gDNA ஆல் நிர்ணயிக்கப்பட்ட பாலின வகைப்பாடு, Sry (Sry/B2m) மதிப்புகளை mRNA பகுப்பாய்வு செய்வதன் மூலம் நிர்ணயிக்கப்பட்ட பாலின வகைப்பாட்டுடன் பொருந்துகிறது. gDNA மற்றும் mRNA இரண்டிற்கும், ஆண்களுக்கும் பெண்களுக்கும் இடையேயான Sry/B2m மதிப்புகளில் புள்ளியியல் ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாடுகள் மொத்தமாகக் கருதப்பட்ட மாதிரிகள் மற்றும் சிகிச்சை குழுக்களால் மாதிரிகள் பிரிக்கப்பட்டபோது காணப்பட்டன (அனைத்து ஒப்பீடுகளும் p <0.01 அல்லது அதற்கும் குறைவாக இருந்தன, மேலும் இரண்டு ஒப்பீடுகளைத் தவிர மற்ற அனைத்தும் p. <0.001 அல்லது கீழே). இறுதியாக, கருவின் பாலினத்தை தீர்மானிக்க SryCq மதிப்புகளைப் பயன்படுத்துவதன் செல்லுபடியாகும் மற்றும் B2m குறிப்பு மரபணுவும் விவாதிக்கப்பட்டது. ஒன்றாக, விஸ்டார் எலிகளில் கரு பாலினத்தை நிர்ணயம் செய்வது ஜிடிஎன்ஏ அல்லது எம்ஆர்என்ஏவில் உள்ள Sry அளவீடுகளைப் பயன்படுத்தி மிகவும் இணக்கமான முடிவுகளுடன் நிறைவேற்றப்படலாம் என்று இந்த ஆய்வு தெரிவிக்கிறது.