கார்டியோவாஸ்குலர் ரிசர்ச் சர்வதேச இதழ்

Aortic Valve Calcification இன் விட்ரோ விலங்கு மாதிரிகளை மேம்படுத்த Na3PO4 ஐப் பயன்படுத்துதல்

டேனியல் அலெஜான்ட்ரோ லெர்மன், சாய் பிரசாத் மற்றும் நஸ்ரி அலோட்டி

Aortic Valve Calcification இன் விட்ரோ விலங்கு மாதிரிகளை மேம்படுத்த Na ₃ PO _{4 ஐப் பயன்படுத்துதல்}

பின்னணி/நோக்கங்கள்: கால்சிஃபிக் பெருநாடி வால்வுலர் நோயின் (CAVD) நோய்க்கிருமி உருவாக்கம், குறிப்பிட்ட ஆஸ்டியோஜெனிக் சிக்னலிங் பாதைகள் மற்றும் அப்போப்டொசிஸ் ஆகியவற்றின் செயல்பாட்டால் வகைப்படுத்தப்படும் வால்வுலர் இன்டர்ஸ்டீடியல் செல்கள் (VICs) செயலில் உள்ள அழற்சி செயல்முறையை உள்ளடக்கியது. சில மூலக்கூறு குறிப்பான்கள் மற்றும் தன்னிச்சையான கால்சிஃபிகேஷன் மரபணு வெளிப்பாடு பாதைகளை பகுப்பாய்வு செய்வதன் மூலம் இந்த செயல்முறையை ஆய்வு செய்யலாம். எங்களின் ஆய்வின் நோக்கம், கால்சிஃபிகேஷன் ஊக்குவிப்பாளராக சோடியம் பாஸ்பேட்டின் (Na ₃ PO ₄ ) பங்கை ஆராய்வதாகும், இது சாத்தியமான கால்சிஃபிகேஷன் தடுப்பான்களைச் சோதிப்பதற்காக விட்ரோ விலங்கு மாதிரிகளை மேம்படுத்தும் நோக்கத்துடன் உள்ளது .

பொருட்கள் மற்றும் முறைகள்: தொடர் கொலாஜனேஸ் செரிமானம் மூலம் 6 ஆரோக்கியமான 6 மாத புதிய போர்சின் இதயங்களிலிருந்து VICகள் பிரித்தெடுக்கப்பட்டன. விஐசிகளின் தன்னிச்சையான கால்சிஃபிகேஷன் போது ஆர்வமுள்ள மரபணுக்களின் மாற்றத்தை அளவிடுவதற்கு அளவு பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (qPCR) பயன்படுத்தப்பட்டது. Na ₃ PO ₄ (3 mM, pH 7.4) சேர்ப்பதன் மூலம் VICகளின் தன்னிச்சையான கால்சிஃபிகேஷன் அதிகரிக்கப்பட்டது . கால்சியம் படிவுக்கான அலிசரின் ரெட் ஸ்டைனிங் மற்றும் கொலாஜனுக்கு சிரியஸ் ரெட் ஸ்டைனிங் மூலம் கால்சிஃபிகேஷன் அளவு மதிப்பிடப்பட்டது. கால்சியம் மற்றும் கொலாஜன் படிவு அளவைக் கண்டறிய வண்ண அளவீட்டு நுட்பங்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன. கூடுதலாக, அல்கலைன் பாஸ்பேடேஸின் (ALP) நொதி செயல்பாடு இயக்கவியல் மதிப்பீட்டின் மூலம் அளவிடப்படுகிறது. புள்ளிவிவர பகுப்பாய்விற்கு நாங்கள் SPSS மற்றும் Microsoft Office Excel 2013 ஐப் பயன்படுத்தினோம்.

முடிவுகள்: கால்சியம் மற்றும் கொலாஜன் படிவு மூலம் போர்சின் VICகள் தன்னிச்சையாக கால்சிஃபை செய்கின்றன. இந்த ஆய்வில் கால்சியம் மற்றும் கொலாஜன் படிவு 0 முதல் நாள் 14 வரை அதிகரிப்பதைக் கண்டோம் (கால்சியம்: 376%; பி <0.001, கொலாஜன்: 3553%; பி <0.001). நாள் 14 க்குள் mRNA இன் qPCR பகுப்பாய்வு பின்வரும் முடிவுகளைக் காட்டியது: மயோபிளாஸ்ட் பினோடைப்பின் குறிப்பானான α-ஆக்டின், 1.6 மடங்கு அதிகரிக்கப்பட்டது; பி<0.001. Runx2, ஒரு ஆஸ்டியோபிளாஸ்ட் மார்க்கர், 1.3 மடங்கு உயர்ந்தது; பி <0.05, TGF-β, ஆஸ்டியோஜெனீசிஸின் ஊக்குவிப்பாளர், 3.2- மடங்கு அதிகரித்தது; P <0.001, மற்றும் RhoA, மயோபிளாஸ்ட்களில் முடிச்சு உருவாக்கத்தின் சீராக்கி, 4.5 மடங்கு அதிகரித்தது; பி<0.001, நாள் 0 இல் உள்ள அவற்றின் அளவுகளுடன் ஒப்பிடும்போது. RANKL mRNA மற்றும் கால்போனின் குறிப்பிடத்தக்க அளவு மாறவில்லை. Na ₃ PO ₄ (3 mM, pH 7.4) உடன் போர்சின் VIC களின் சிகிச்சையானது நாள் 14 இல் கால்சியம் படிவில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்புக்கு வழிவகுத்தது (522%; P<0.001), மற்றும் ALP செயல்பாட்டில் 7 ஆம் நாள் (228%); பி<0.05). 14 ஆம் நாளுக்குள் குழுக்களிடையே ALP செயல்பாட்டில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்கள் எதுவும் இல்லை.

முடிவு: கால்சியம், கொலாஜன் மற்றும் ALP செயல்பாட்டின் செயலில் அதிகரிப்புடன் பெருநாடி விஐசிகளின் தன்னிச்சையான கால்சிஃபிகேஷன் போது சில குறிப்பிட்ட மூலக்கூறுகளை அதிகப்படுத்துவதை இந்த ஆய்வு நிரூபித்துள்ளது. இந்த இன் விட்ரோ மாதிரியில், Na ₃ PO ₄ (3 mM, pH 7.4) உடன் தன்னிச்சையான VICகளின் கால்சிஃபிகேஷனை அதிகரிக்க முடியும் , இதில் கால்சிஃபிகேஷன் தடுப்பான்கள் கால்சிஃபிக் பெருநாடி ஸ்டெனோசிஸுக்கு எதிரான ஒரு புதிய சாத்தியமான சிகிச்சை மூலோபாயத்தை அடையாளம் காண சோதனை செய்யப்படும்.